<label id="89q8b"><meter id="89q8b"><bdo id="89q8b"></bdo></meter></label>

      <span id="89q8b"></span>
        <span id="89q8b"><optgroup id="89q8b"></optgroup></span>
        <label id="89q8b"><meter id="89q8b"><bdo id="89q8b"></bdo></meter></label>

          產品中心您現在的位置:首頁 > 產品展示 > > 生化試劑盒 > Ca2+—ATP酶試劑盒

          Ca2+—ATP酶試劑盒

          更新時間:2024-06-20

          簡要描述:

          Ca2+—ATP酶試劑盒
          Ca2+是細胞內重要的信號分子,細胞質基質始終維持在一個較低水平的 Ca2+濃度,Ca2+ 濃度的維持主要由 Ca2+-ATP 酶來維持

          Ca2+—ATP酶試劑盒

          Ca2+—ATP酶試劑盒

          試劑盒僅供科研使用 1

          Ca2+ - ATP 酶活性測定說明書 (貨號:WS0680F 分光法 24 樣) 一、產品簡介: Ca2+是細胞內重要的信號分子,細胞質基質始終維持在一個較低水平的 Ca2+濃度,Ca2+ 濃度的維持主要由 Ca2+-ATP 酶來維持,該酶可催化 ATP 水解生成 ADP 和無機磷。通過 測定無機磷的量來確定該酶活性高低。 二、所需的儀器和用品: 可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液 器、研缽、冰和蒸餾水。 三、試劑盒的組成和配制: 【注】:全程操作需無磷環境;試劑配置用新的槍頭和玻璃移液器等,也可以用一次性塑料器皿,避 免磷污染。 四、Ca2+-ATP 酶活性檢測: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗 樣本和試劑浪費! 1、樣本制備: ① 組織樣本: 稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液,進行冰浴勻漿。 4×12000rpm 離心 10min,取 上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取。 ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(104):提取液(mL)500~10001 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 2、上機檢測: ① 可見分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 700nm,蒸餾水調零。 ② 所有試劑解凍至室溫(25℃)。 ③ 在 EP 管中依次加入: 試劑名稱(μL測定管 對照管 試劑一 200 提取液 200 試劑名稱 規格 保存要求 備注 提取液 提取液 60mL×1 4℃保存 試劑一 粉體 mg×1 4℃保存 用前甩幾下使試劑落入底部,再加 8mL 提取液,混勻溶解備用。 試劑二 粉體×1 -20℃保存 用前甩幾下使試劑落入底部,再加 15mL 提取液,混勻溶解備用。 試劑三 液體 4mL×1 4℃保存 試劑四 A:粉體 mg×1 B:液體 3mL×1 4℃保存 臨用前試劑 A 中加 2.9mL B 液,再加 37.1mL 的蒸餾水,混勻溶解備用。 標準品 粉體 mg×1 4℃保存 若重新做標曲,則用到該試劑本試劑盒僅供科研使用 2 樣本 200 試劑二 200 200 37℃ 孵育 20min 試劑三 80 80 樣本 200 混勻,12000rpm4℃離心 5min,上清液待測 ④ 顯色反應: 上清液 150 150 試劑四 600 600 混勻,室溫靜置 3min700nm 下讀取各管吸光值, A=A 測定-A 對照(每個樣本做一個自身對照)。 五、結果計算: 1、標準曲線方程:y =0.8474x - 0.0164x 是標準品摩爾質量(μmol/mL, y A2、按蛋白濃度計算: 定義:每小時每毫克組織蛋白分解 ATP 產生 1μmol 無機磷的量為一個酶活力單位。 酶活力(μmol/h/mg prot)=[(A+0.0164)÷0.8474×V2]÷(V1×Cpr)÷T =12.04×(A+0.0164)÷Cpr 3、按樣本鮮重計算: 定義:每小時每克組織分解 ATP 產生 1μmol 無機磷的量為一個酶活力單位。 酶活力(μmol/h/g 鮮重)=[(A+0.0164)÷0.8474×V2]÷(W× V1÷V)÷T =12.04×(A+0.0164)÷W 4、按細菌或細胞密度計算: 定義:每小時每 1 萬個細菌或細胞分解 ATP 產生 1μmol 無機磷的量為一個酶活力單位。 酶活力(μmol/h /104 cell)=[(A+0.0164)÷0.8474×V2]÷(500×V1÷V)÷T =0.024×(A+0.0164) 5、液體中 Ca2+-ATPase 活力計算: 定義:每小時每毫升液體分解 ATP 產生 1μmol 無機磷的量為一個酶活力單位。 酶活力(μmol/h/mL)=[(A+0.0164)÷0.8474×V2]÷V1÷T=12.04×(A+0.0164) V---加入提取液體積,1mLV1---加入樣本體積,0.2mL V2---酶促反應總體積,0.68mLT---反應時間,1/3 小時; W---樣本鮮重,g500---細菌或細胞總數,萬; Cpr---樣本蛋白質濃度,mg/mL;建議使用本公司的 BCA 蛋白含量檢測試劑盒。 附:標準曲線制作過程: 1 制備標準品母液(5μmol/mL):標準品用 10mL 試劑一溶解。(母液需在兩天內用)。 2 把母液稀釋成六個濃度梯度的標準品:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. μmol/mL。也可根據實際樣本來調整 標準品濃度。 3 依據顯色反應階段測定管的加樣體系操作,根據結果即可制作標準曲線。

          留言框

          • 產品:

          • 您的單位:

          • 您的姓名:

          • 聯系電話:

          • 常用郵箱:

          • 省份:

          • 詳細地址:

          • 補充說明:

          • 驗證碼:

            請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7
          上海宇淳生物科技有限公司

          上海宇淳生物科技有限公司

          地址:上海市南航公路1981弄72號

          版權所有:上海宇淳生物科技有限公司  備案號:  總訪問量:240810  站點地圖  技術支持:環保在線  管理登陸

          主站蜘蛛池模板: 国产成人免费a在线视频app| 免费看无码特级毛片| 久久久久久国产精品免费免费男同| 国产又大又粗又硬又长免费| 亚洲一级毛片在线观| 亚洲成人免费在线观看| 亚洲激情视频在线观看| a级精品九九九大片免费看| 久久国产成人精品国产成人亚洲| 综合一区自拍亚洲综合图区| 日韩免费高清视频网站| 亚洲经典千人经典日产| 亚洲日产2021三区在线| 无人在线观看免费高清| 亚洲国产高清人在线| 日韩人妻一区二区三区免费 | 亚洲欧洲免费无码| 亚洲沟沟美女亚洲沟沟| 91网站免费观看| 亚洲一区二区无码偷拍| 永久免费看mv网站入口| 精品久久香蕉国产线看观看亚洲| a级毛片免费观看在线| 久久久久亚洲AV成人网人人网站 | 5g影院5g天天爽永久免费影院 | 四虎免费影院ww4164h| 免费va在线观看| 日韩在线视频播放免费视频完整版| 亚洲AV无码成H人在线观看| 一级中文字幕乱码免费| 在线a亚洲v天堂网2019无码| 国产精品99精品久久免费| 中文字幕在线观看亚洲| 精品国产免费一区二区三区| 国产AV无码专区亚洲AV手机麻豆| 青青草原1769久久免费播放| 亚洲欧洲精品一区二区三区| 好吊妞视频免费视频| 一级a性色生活片久久无少妇一级婬片免费放 | 亚洲国产成人综合| 日韩精品无码人妻免费视频|