更新時間:2021-12-23
GelStain核酸電泳染料:超靈敏/超穩定的第三代熒光核酸染料,實驗表明在凝膠染色濃度下無致突變性, 通過熒光共振能量轉移FRET的*設計改善了同類產品對大片段DNA條帶拖尾模糊的現象 帶形清晰整齊,定量準確, 染色均勻, 靈敏度高, 穩定性高。
GelStain核酸電泳染料
特點:
1. 條帶美觀:克服了染料10000X GelRed分不開大片段DNA的缺點,條帶清晰整齊美觀。
2. 相對安全:*油性大分子(分子量>1000)使其不易穿透活細胞膜進入細胞,大分子的染料遠超過DNA雙螺旋間的尺寸,使其難以插入DNA雙鏈內從而可能引起突變。實驗表明在工作濃度(凝膠染色濃度)下該染料的沒有EB類似的誘變性,使用相對安全,可以代替致癌物溴化乙錠EB作為各種核酸電泳的染色劑。
3. 遷移率好:EB小分子很快跑出膠外,所以EB容易導致小DNA段看不清,改善了這一缺點。
4. 定量準確:適用于代替EB進行核酸分子大小的確定和定量,EB對小DNA段定量不準確。
5. 染色均勻:整個凝膠負一邊和正一邊的亮度一樣。克服了EB會導致膠的整體背景高發白,經常出現陰陽背景(膠的背景一部分亮一部分暗);長時間/長距離的電泳,EB信號強度會相應下降的缺點。
6. 靈敏度高:亮度高靈敏度高于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBR Green。
7. 穩定性高:耐熱,可加在緩沖液里,100℃溶解凝膠,防止染色劑沒充分混勻。適用于微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠。
8. 耐光性強:實驗室的日常環境下可以常溫放置24個月以上(不能太陽光照射和紫外燈照射)。
9. 信噪比好:樣品熒光信號強,背景信號低。
10. 操作簡單:與EB用法*一樣,在預制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30 分鐘且無需脫色或沖洗。
11. 應用范圍:核酸染料、核酸檢測:適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。
12. 兼容性好:適合紫外凝膠透射儀;和適合藍光儀和可見光儀器。與EB有相近的光譜特性,無需改變濾光片及觀察裝置:標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用和EB相同紫外凝膠透射儀,在300nm紫外光附近可得到最佳激發。
GelStain核酸電泳染料
操作步驟:
一、瓊脂糖凝膠電泳染色(詳細方法請與銷售人員索要說明書,推薦方法)
將Nucleic Acid Dye加入凝膠中
1.制膠:常規方法制備瓊脂糖凝膠, 加入試劑使其在凝膠中的終濃度為1x (例如: 制備50ml的凝膠, 加入染料5μl),輕輕搖勻后倒膠。
2.按常規方法電泳,觀測結果。
二、泡染法
(1)按照以上常規方法進行電泳。 用于膠回收等高濃度DNA樣品強烈推薦泡染法!
(2)將Red10,000×儲液稀釋約10000倍到水中制成1×染色液。
(3)將凝膠小心地放入合適的容器中(如聚丙烯容器中)緩慢加入足量的1× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,最佳染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含1%的瓊脂糖凝膠,染色時間約30min。
(4)用302nm激發的紫外凝膠成像系統觀察結果。