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          Super ECL Plus超敏發光液

          更新時間:2019-05-05

          簡要描述:

          Super ECL Plus超敏發光液
          儲存:4℃密封避光保存一年以上。短期可放置室溫。

          安全性:無特殊毒性,按普通化學品處理。

          1. 產品描述:

          Super ECL Plus超敏發光液用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關聯的抗原。由于采用了*的發光底物系統,Super ECL Plus超敏發光液是目前靈敏的商業化熒光ECL檢測試劑:

          (1)具有*靈敏度和高信噪比,可檢測10~100 fg抗原;

          (2)可在日光燈下進行發光操作;

          (3)發光迅速,熒光可使X光膠片感光達12小時以上,特別適用于痕量蛋白或核酸檢測;

          (4) 可使用更高的抗體稀釋倍數(1:2000~1:10000),極其節省抗體。

          2. 用途:用于HRP標記抗體的Western BlotHRP標記探針的核酸雜交。

          3. 使用方法:

          (1)執行常規SDS-PAGE、轉膜和Western Blot步驟。注意用HRP標記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。

          (2)Western Blot后一次洗膜的同時新鮮配制發光工作液:分別取等體積的溶液A和B,放入干凈容器中混合。建議立即使用工作液,室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低。

          (3)用鑷子取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜*干燥。將膜*浸入發光工作液(0.125mL發光工作液/cm2膜)中,與發光工作液充分接觸。室溫孵育3分鐘,準備立即壓片曝光。孵育時間過長不會增加靈敏度,有時還會導致曝光條帶異常。發光過程的本質是酶促反應,使用過少的發光工作液不利反應進行,也會導致膜上條帶曝光不均和明顯降低靈敏度。為達節約目的可將膜剪小但勿降低發光液用量。

          (4)用鑷子夾起膜,搭在濾紙上瀝干發光工作液。但勿洗去發光液。

          (5)打開X光膠片暗盒,在暗盒內表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將Western Blot膜貼在保鮮膜上,將保鮮膜折起來*包裹Western Blot膜,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發光工作液。用膠帶將覆蓋Western Blot膜的保鮮膜固定在暗盒內,蛋帶面向上。

          (6)暗房內壓X光膠片,分別曝光不同的時間如數秒到數分鐘。顯影沖洗。           

          4. 儲存:4℃密封避光保存一年以上。短期可放置室溫。

          5. 安全性:無特殊毒性,按普通化學品處理。

           

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