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          CelRed 核酸染料(10,000× DMSO溶液)

          更新時間:2019-05-09

          簡要描述:

          CelRed 核酸染料(10,000× DMSO溶液)
          注意事項:
          用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
          3&#215; CelRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。

          CelRed 核酸染料(10,000× DMSO溶液)

          CelRed 核酸染料(10,000× DMSO溶液)

          CelRed核酸染料特點

          ● 無毒性:CelRed *的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內,艾姆斯氏試驗結果也表明,該染料的誘變性遠遠小于EB。

          ● 靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。

          ● 穩定性高: 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩定,耐光性強。

          ● 信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。

          ● 操作簡單:與 EB 一樣,在預制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30 分鐘且無需脫色或沖洗 ,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。

          ● 適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

          ● 與EB有相同的光譜特性,無需改變濾光片及觀察裝置:標準的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在 300nm 紫外光附近可得到hao激發。但是CelRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光*激發,因此不推薦使用此類激發裝置的成像系統。對于此類裝置,我們推薦您使用CelGreen(Cat# 011或012),它和SYBR Green I的光譜相似,靈敏度相當,但更加穩定。

          CelRed使用方法簡介

          1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)

          (1) 制膠時加入CelRed 核酸染料(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL CelRed 10,000× 儲液,

          以此比例類推)。

          (2) 按照常規方法進行電泳。

          注意事項:

          此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。

          由于CelRed具有良好的熱穩定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將CelRed儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。CelRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

          如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。

          此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。

          2.泡染法

          (1) 按照常規方法進行電泳。

          (2) 用H2O將CelRed 10,000× 儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如將15μL CelRed 10,000× 儲液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。

          (3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,hao染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5~10%丙烯酰胺的凝膠,染色時間通常介于30min到1h,并隨丙烯酰胺含量增加而延長。

          注意事項:

          用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。

          3× CelRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。

           

          500 μL¥530

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